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武汉科技大学2019年全国硕士研究生招生考试初试自命题616分子生物学B卷试题及答案

类型:全真试卷  解析:无解析  年份:2019  ★收藏  ✚纠错

一、将下列名词翻译成中文,并简要解释 (共6小题,每小题5分,共30分) Transcription TATA box RNA interference Missense mutation Ribosomal binding site Northern blot hybridization 二、简答题(共6小题,每小题15分,共90分) 简述真核生物转录水平的调控机制。 简述乳糖操纵子的结构及其正、负调控机制。 简述Sanger双脱氧链终止法的原理。 DNA在复制过程中如何保持准确性? 简述翻译的主要过程及特点。 什么是DNA损伤?生物体DNA损伤与哪些因素有关?生物细胞有哪些机制来处理DNA损伤,并进行DNA损伤修复? 三、论述题 (共1小题,共30分)
在你的研究中发现,A蛋白能够下调蛋白B的表达,对此你比较感兴趣,请设计一些实验开展进一步研究,分析A调控B的可能机制,对采用的方法的原理进行说明,并对结果进行判定。
参考答案
一、将下列名词翻译成中文,并简要解释 (共6小题,每小题5分,共30分) Transcription:转录:生物体以DNA为模板合成RNA的过程称为转录。 TATA box:TATA盒:在真核生物RNA聚合酶II转录单位起始点前25bp处发现的保守的富含AT的七联体,可能涉及RNA聚合酶的正确起始定位。 RNA interference:RNA干扰:siRNA是一类长21-25个核苷酸的双链RNA,产生于病毒感染或其他双链RNA ……此处隐藏10603个字…… 的对照,而且对结果的分析也需要有一定的经验。对于刚刚开始使用ChIP技术的研究人员来说,使用成熟的商品化试剂盒和相关的技术服务会达到事半功倍的效果。
EMSA实验:EMSA主要基于蛋白-探针复合物在在凝胶电泳过程中迁移较慢的原理。根据实验设计特异性和非特异性探针,当核酸探针与样本蛋白混合孵育时,样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物;这种复合物由于分子量大,在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时迁移较慢,而没有结合蛋白的探针则较快;孵育的样本在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳并转膜后,蛋白-探针复合物会在膜靠前的位置形成一条带,说明有蛋白与目标探针发送互作。(15分)
(2)A通过与B相互作用进而调控其表达
细胞共定位实验:通过将两个蛋白分别连接至不同的标签载体,且载体分别带RFP和GFP,然后转染目标细胞,通过观察荧光确定两个蛋白的共定位情况。
CoIP实验:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白,那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离,对B蛋白进行检测,进而证明两者间的相互作用。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。(15分)
 

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