一、名词解释(共5小题,每小题6分,共30分)
1、(6分)基因,基因组
2、(6分)顺式作用元件,反式作用因子
3、(6分)复制子,复制叉
4、(6分)操纵子,操作基因
5、(6分)不依赖ρ因子的终止,依赖ρ因子的终止
二、简答题(共7小题,每小题10分,共70分)
1、(10分)什么是启动子?请描述典型的原核生物启动子的结构特点。
2、(10分)请列举RNA的类型,并说明它们在细胞里的生物学功能。(至少列举5个)
3、(10分)简述原核生物和真核生物在染色体结构、基因结构和基因表达方面的主要差异。
4、(10分)简述DNA重组技术的概念,及其基本操作过程。
5、(10分)简述真核生物核小体的结构特点。
6、(10分)简述原核生物蛋白质合成的延伸过程。
7、(10分)什么是CAR-T细胞免疫疗法?简述CAR-T疗法原理和操作过程。
三、论述题(共1小题,每小题30分,共30分)
1、(30分)原核生物对外界环境的变化例如营养物质、温度等,会在基因水平上做出迅速的响应。请以大肠杆菌色氨酸操纵子为例,详细阐述这一调控机制。
四、实验综合题(共2小题,每小题10分,共20分)
1、(10分)依据碱变性法提取质粒DNA实验,回答下列问题。
(1)溶液I,溶液II,溶液III的作用分别是什么?
(2)加入溶液I,溶液II,溶液III的操作要领是什么?会出现什么样的 ……此处隐藏12578个字…… p>
答:溶液I是缓冲液,重悬菌体;溶液II,由SDS和NaOH组成,起到破细胞和使蛋白、DNA变性的作用。溶液III,主要是乙酸钾或者乙酸钠,pH4.8,质粒DNA迅速复性,基因组DNA来不及复性,与蛋白一起沉淀下来。(4分)
(2)加入溶液I,溶液II,溶液III的操作要领是什么?会出现什么样的实验现象?
答:加入溶液I,剧烈震荡,充分悬浮菌体;形成均匀的菌悬液;
加入溶液II,迅速温和颠倒混匀;溶液变得澄清;
加入溶液III,迅速温和颠倒混匀;形成白色絮状沉淀。(6分)
2、(10分)依据质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳检测实验,回答下列问题。
(1)质粒DNA电泳时,一般会有三条条带,这三条带分别是什么形态的DNA?电泳时,跑在最前面的是什么形态的DNA?
答:这三条带分别是超螺旋DNA、开环DNA、线性DNA。质粒电泳时,跑在最前面的是超螺旋DNA、其次是线性DNA、跑在最后面的是开环DNA。(4分)
(2)电泳检测时,加入的溴化乙锭起什么作用?
答:溴化乙锭是一种高灵敏度的荧光染色剂,可以与质粒DNA结合,经紫外线照射后发出橙色荧光,用于观察琼脂糖凝胶中DNA条带的位置。(3分)
(3)制备琼脂糖凝胶时,如何确定琼脂糖凝胶的浓度?
答:质粒DNA带负电荷,在电场中会从负极向正极泳动,琼脂糖凝胶具有分子筛效应,质粒DNA泳动速率与DNA的大小和构象有关,构象相同的情况下,分子量越大,泳动越慢,琼脂糖凝胶浓度要制备低一些;反之,分子量越小,泳动越快,琼脂糖凝胶浓度要制备高一些。(3分)